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植物的组织培养技术

 

一周强化

一、一周知识概述

1、植物组织培养基础知识;

2、植物组织培养过程中使用的无菌技术;

3、被子植物花粉发育的过程;

4、产生花粉植株的途径;

5、影响花药培养的因素。

二、重点知识归纳及讲解

(一)植物组织培养

1、细胞的全能性

  (1)概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。

  (2)基础:生物体的每一个细胞都含有本物种的全套遗传物质,都有发育成完整个体所必需的全套基因。

  (3)生物体内细胞没有表现出全能性,是基因在特定的时间和空间条件下选择性表达,形成不同的组织和器官的结果。

2、植物组织培养的基本过程

3、实现条件

  (1)离体状态;

  (2)提供营养物质;

  (3)提供激素(细胞分裂素和生长素);

  (4)提供其他适宜条件(如温度、酸碱度)。

4、影响植物组织培养的因素

  (1)材料的选择:不同的植物组织;同一植物,材料的年龄、保存时间的长短等。

  (2)营养条件:培养基、植物激素(激素的种类、比例)。

  (3)环境条件:pH、温度、光照等。

5、应用

  (1)快速繁殖、培育无病毒植物;

  (2)生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂;

  (3)制造人工种子;

  (4)转基因植物的培育;

  ……

(二)菊花的组织培养

1、制备MS固体培养基

2、外植体消毒

3、接种

4、培养

5、移栽

6、栽培

思考:MS培养基中营养物质的作用有哪些?它与微生物培养基的配方相比有什么不同?

  MS培养基中的微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。

  微生物培养基以有机营养为主,MS培养基则需提供大量无机营养。无机盐混合物包括植物生长必需的大量元素和微量元素两大类。

(三)被子植物的花粉发育

(四)产生花粉植株的两条途径

(五)影响花药培养的因素

1、材料的选择

  (1)亲本植株的生理状况:单核期(完全未开放的花蕾)成功率最高。

  (2)亲本植株的生长条件:是否健壮。

2、培养基的组成

3、材料的低温预处理、接种密度等

(六)花药培养的实验操作

1、材料的选取

  通过镜检选择花药,常用的方法是:

  (1)醋酸洋红法

  (2)焙花青—铬矾法

2、材料的消毒

3、接种和培养

思考:植物组织培养技术与花药培养技术有何异同?

  相同之处:培养基配制方法、无菌技术及接种操作基本相同。

  不同之处:花药培养的选材非常重要,需事先摸索时期适宜的花蕾;花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基;花药培养对培养基配方的要求更为严格。

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